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茶叶科学 ›› 1998, Vol. 18 ›› Issue (01): 16-20.doi: 10.13305/j.cnki.jts.1998.01.003

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茶树RAPD反应系统和扩增程序优化

陈亮,高其康,杨亚军,虞富莲,陈大明   

  1. 中国农业科学院茶叶研究所!杭州,310008,浙江农业大学!杭州,310029,中国农业科学院茶叶研究所!杭州,310008,中国农业科学院茶叶研究所!杭州,310008,浙江农业大学!杭州,310029
  • 出版日期:1998-05-15 发布日期:1998-05-15
  • 基金资助:
    九五”国家攻关专题!96-014-01-05;农业部重点专题!95农-01-03-01;中国农业科学院院长基金

  • Online:1998-05-15 Published:1998-05-15

摘要: 以龙井43为材料,使用国产PCR仪,对茶树RAPD分析中影响PCR扩增结果的因素进行了研究,确定了茶树RAPD的最适反应系统和扩增程序,即在25μl反应体系中,含25~50ng模板DNA、2mmol/LMgCl2、各0.2mmo/LdNTPs、0.2μmol/L引物和0.5~1.0UTanDNA聚合酶;扩增程序为:94℃预变性180s,94℃变性60s,38℃退火90s,72℃延伸120s,共进行40~45个循环,最后72℃延伸300~600s,这样可以取得较好的扩增结果。

关键词: 茶树, RAPD, 反应系统, 扩增程序