Bt基因表达载体的构建及对茶树遗传转化的研究

骆颖颖; 梁月荣

doi:10.13305/j.cnki.jts.2000.01.014

茶叶科学 >

2000 , Vol. 20 >Issue 02: 141 - 147

DOI: https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2000.01.014

Bt基因表达载体的构建及对茶树遗传转化的研究

骆颖颖 ,
梁月荣

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浙江大学茶学系!浙江杭州310029,浙江大学茶学系!浙江杭州310029

网络出版日期: 2000-02-20

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国家自然科学基金资助项目! (39770 45 7); 浙江省科委资助项目! (96 1 1 2 1 1 0 )内容之一

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摘要

用限制性内切酶HindⅢ和BglⅡ从pGA4 71质粒中切取Bt基因并转入载体pCAMBIA2 30 1中 ,构建后的质粒含Bt基因、intron -GUS基因和NPTⅡ基因。将构建后的质粒转化大肠杆菌 ,通过三亲交配法分别导入农杆菌菌株LBA4 4 0 4、EHA10 5、pRi15834中。以茶树叶片、愈伤组织为转化的受体材料 ,用农杆菌介导法将其转入茶树中 ,获得了GUS瞬间表达。以潮霉素作为愈伤组织筛选的选择性试剂 ,效果明显优于卡那霉素 ,适宜浓度为 2 0 μ/ml;以卡那霉素作为茶树叶片材料的筛选试剂 ,50 μ/ml为宜。

关键词： 茶树; 遗传转化; 质粒构建; Bt抗虫基因; 农杆菌介导法

本文引用格式

骆颖颖 , 梁月荣 . Bt基因表达载体的构建及对茶树遗传转化的研究[J]. 茶叶科学, 2000 , 20(02) : 141 -147 . DOI: 10.13305/j.cnki.jts.2000.01.014

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