茶树多酚氧化酶基因的生物信息学分析及原核表达

doi:10.13305/j.cnki.jts.2011.01.006

茶叶科学 ›› 2011, Vol. 31 ›› Issue (1): 33-39.doi: 10.13305/j.cnki.jts.2011.01.006

茶树多酚氧化酶基因的生物信息学分析及原核表达

王乃栋, 张丽霞^*, 向勤锃, 李巍巍

山东农业大学园艺科学与工程学院,作物生物学国家重点实验室,山东泰安 271018

收稿日期:2010-04-22 修回日期:2010-06-30 出版日期:2011-02-15 发布日期:2019-09-06
作者简介:王乃栋（1984— ）,男,山东泰安人,博士研究生,主要从事茶叶生物技术研究。
基金资助:
山东省自然科学基金项目（ZR2010CM026）、山东省泰安市大学生创新行动计划项目 (2009D1016)

Bioinformatic Analysis and Prokaryotic Expression of Polyphenol Oxidase Gene in Tea Plant (Camellia sinensis)

WANG Nai-dong, ZHANG Li-xia^*, XIANG Qin-zeng, LI Wei-wei

College of horticμlture science and engineering, state key laboratory of crop biology, Tai^,an 271018, China

Received:2010-04-22 Revised:2010-06-30 Online:2011-02-15 Published:2019-09-06

摘要/Abstract

摘要： 通过PCR方法扩增出迎霜品种茶多酚氧化酶（PPO）的编码区序列,并将其登录于GenBank,注册号为GQ214317。生物信息学分析表明,该基因编码区全长1800bp,编码599个氨基酸,分子式为C₃₀₀₈H₄₆₇₇N₈₁₃O₉₀₀S₁₈,存在两个铜离子结合域,没有跨膜区;进化树分析表明,茶与毛叶茶亲缘关系最近。成功构建了原核表达载体pET-ppo,并转化E. coli BL21（DE3）,实现了PPO的原核表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明,在71KD处有一条特异蛋白条带,与预测大小相符。

关键词: 多酚氧化酶, 生物信息学分析, 原核表达

Abstract: The polyphenol oxidase (PPO, GenBank accession No. DQ812086) gene was amplified by PCR. Bioinformatics analysis indicated that the cds of PPO DNA sequence is 1800bp, which encoded a protein of 599 amino acid residues (molecular formula: C₃₀₀₈H₄₆₇₇N₈₁₃O₉₀₀S₁₈) and predicted that it had two Cu-band functional domains with no transmembrane. The phylogeny analysis showed that it has a most close phylogenetic relationship with Camellia nitidissima. The PPO was cloned into pET28a vector to construct recombination prokaryotic expression vector pET-ppo. After transformed to E1coli BL21 and induced by isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside(IPTG), recombinant protein about 71kD was expressed in pET28a system and separated by SDS-PAGE electrophoresis.

Key words: polyphenol oxidase, bioinformatics analysis, prokaryotic expression

中图分类号:

S571.1
Q786

王乃栋, 张丽霞, 向勤锃, 李巍巍. 茶树多酚氧化酶基因的生物信息学分析及原核表达[J]. 茶叶科学, 2011, 31(1): 33-39. doi: 10.13305/j.cnki.jts.2011.01.006.

WANG Nai-dong, ZHANG Li-xia, XIANG Qin-zeng, LI Wei-wei. Bioinformatic Analysis and Prokaryotic Expression of Polyphenol Oxidase Gene in Tea Plant (Camellia sinensis)[J]. Journal of Tea Science, 2011, 31(1): 33-39. doi: 10.13305/j.cnki.jts.2011.01.006.

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茶树多酚氧化酶基因的生物信息学分析及原核表达

Bioinformatic Analysis and Prokaryotic Expression of Polyphenol Oxidase Gene in Tea Plant (Camellia sinensis)

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