2011年, 第31卷, 第4期　
刊出日期：2011-08-15

  

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  茶叶中7种除草剂农药残留气相色谱–串联质谱测定

  陈红平, 刘新, 汪庆华, 蒋迎

  茶叶科学. 2011, 31(4): 283-288. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.008

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  建立了加速溶剂萃取提取（ASE）,凝胶净化系统净化（GPC）样品前处理,气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）测定茶叶中7种除草剂农药残留量。茶叶样品用乙腈溶剂经ASE提取,GPC净化,乙酸乙酯/环己烷（等体积比）淋洗。GC-MS/MS采用多反应监测模式（MRM）。结果表明,在添加农药标准0.010、0.100μg/g时,7种杀虫剂农药的平均回收率为78.2%~93.6%,相对变异系数（RSD）（n=5）为5.8%~19.1%。方法检出限为2.0~8.0ng/g。该方法可靠,准确,灵敏度高,操作简单,自动化程序高,适用于茶叶中7种除草剂农药残留检测。
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  茶毛虫核型多角体病毒不同分离株的毒力水平与遗传结构关系分析

  付建玉, 席羽, 唐美君, 殷坤山, 肖强

  茶叶科学. 2011, 31(4): 289-294. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.009

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  4个茶毛虫核型多角体病毒（EpNPV）分离株对茶毛虫的毒力测定结果表明,浙江分离株的毒力最强,其LC₅₀为2.5×10⁶PIB/mL;湖南分离株的毒力最弱,其LC₅₀为13.36×10⁶PIB/mL。不同分离株的毒力强弱依次为浙江分离株>贵州分离株>湖北分离株>湖南分离株,但贵州分离株与湖北分离株的毒力相差不大,LC₅₀分别为9.5×10⁶PIB/mL和7.31×10⁶PIB/mL。测定了EpNPV 4个分离株的5个与病毒复制、病毒—宿主关系、毒力水平相关的功能基因序列,分析其不同株系间的遗传结构,发现湖北分离株和贵州、湖南两分离株的相似度最高（99.7%）;浙江分离株和湖南分离株间的相似度最低（99.4%）。基于5个基因拼接序列构建的系统进化树显示,湖南（HN）和湖北（HB）两个株系最先聚类并为一支,再与贵州（GZ）分离株聚类,最后才与浙江分离株（ZJ）聚合,说明浙江分离株与其他3个分离株的遗传距离均较远。试验结果初步表明,EpNPV不同株系间的毒力水平差异与其遗传结构差异明显相关。
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  对蓟马类害虫高致病性球孢白僵菌的分离、鉴定

  王俊平, 郑长英

  茶叶科学. 2011, 31(4): 295-299. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.010

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  从草履蚧僵虫体内分离出12株病原真菌,对蓟马类昆虫具有70%~90%的致死率。现选出一株病原真菌CYT10利用形态和分子的特点进行鉴定。扫描电镜下观察,该菌产孢细胞簇生瓶状,“之”型产孢轴。经PCR获得rDNA-ITS和EF1-a核苷酸序列,与其他球孢白僵菌的相应序列一致性达95%以上,进化分析CYT10菌株与球孢白僵菌Beauveria bassiana聚为一类。根据菌株的形态观察和DNA序列分析确定该菌为球孢白僵菌。
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  工夫红茶发酵过程中发酵叶茶汤吸光值变化的研究

  刘晓东, 刘玉芳, 甘春萍, 杨春, 汤周斌

  茶叶科学. 2011, 31(4): 300-304. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.003

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  为了解工夫红茶发酵过程发酵叶茶汤中茶黄素水溶液颜色的变化规律,本试验对不同茶树品种、不同鲜叶嫩度、不同季节生产工夫红茶时,不同发酵时间发酵叶茶汤用分光光度计在波长460nm处测定其吸光值。试验结果表明,不同茶树品种、不同鲜叶嫩度、不同季节生产工夫红茶时,在发酵过程中,不同发酵时间发酵叶茶汤吸光值的大小、最高值及变化速率都有所不同,但随着发酵时间的延长,发酵叶茶汤吸光值呈小→大→小的变化规律,符合工夫红茶发酵过程中茶黄素含量的变化规律。
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  乌龙茶品质评定与产品判别研究

  孙威江, 董青华, 周卫龙, 董秀云

  茶叶科学. 2011, 31(4): 305-312. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.004

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  采用闽南、闽北和广东乌龙茶为样本,进行了基于化学成分、因子分析和判别分析的茶样品质评定和产品判别模型研究。应用因子分析得出累积变异量为85.041%的7个公共因子,再以公共因子为自变量,采用同步判别分析法对茶样进行产地、品种和级别鉴别,建立判别函数;交叉验证和回代样本验证结果显示,产地和品种的判别模型正确区别度较高,产地的回代和交叉验证总正判率分别为97.6%和94.0%,品种的为86.9%和75.0%。并确立7个乌龙茶品质因子得分函数和1个综合评价函数,得到判别效果良好的产地判别函数3条、品种判别函数6条。
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  绿茶酒液态发酵工艺参数的优化研究

  李建芳, 周颖, 周枫, 王荣荣, 方玲

  茶叶科学. 2011, 31(4): 313-318. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.005

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  以信阳毛尖为主要原料,对影响其液态发酵工艺过程的4个因素进行单因素试验,并设计L₉（3⁴）正交优化试验,对其结果进行直观分析,确定毛尖茶酒最佳液态发酵工艺条件为：接种量0.3‰,蔗糖添加量180g/L,pH4.6,温度24℃,发酵时间12d。采用该条件生产的绿茶酒不仅具有茶香和酒香,酸甜适口,且富含功能成分,是一种老少皆宜的保健饮品。
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  茶树密码子用法分析

  赵洋, 杨阳, 刘振, 杨培迪

  茶叶科学. 2011, 31(4): 319-325. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.013

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  运用CodonW软件和CUSP程序对筛选的134个茶树蛋白质编码基因序列进行了分析、计算密码子使用频率,并将它与人、果蝇、酵母、大肠杆菌这4种代表性生物及拟南芥、大豆、棉花、水稻、小麦等单、双子叶植物进行比较。结果显示茶树密码子偏爱性与人、果蝇、酵母、大肠杆菌有不同程度的差异,与单子叶植物水稻、小麦的密码子使用频率差异较大,与双子叶植物拟南芥、大豆、棉花的密码子偏爱性一致,分析结果对茶树基因转化及高效表达系统的选择等具有重要指导意义。
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  茶树花青素还原酶基因在大肠杆菌中的表达及优化

  骆洋, 王弘雪, 王云生, 卢忠尉, 刘亚军, 单育, 陈啸天, 叶辉, 高丽萍, 夏涛

  茶叶科学. 2011, 31(4): 326-332. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.014

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  茶树花青素还原酶是催化非酯型儿茶素EC和EGC合成的关键酶。采用RT-PCR技术,获得了茶树花青素还原酶基因的开放阅读框,它编码含337个氨基酸的蛋白质,推测分子量为37kD,等电点为6.54;成功地将该基因重组到表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中诱导时间、诱导温度、IPTG浓度、氨苄青霉素浓度,纯化出目的蛋白。HPLC检测表明,目的蛋白具有ANR酶活性。
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  EGCG-O-甲基转移酶(EOMT)在重组大肠杆菌中的表达条件研究

  费冬梅, 林智, 吕海鹏, 张悦, 谭俊峰, 郭丽

  茶叶科学. 2011, 31(4): 333-340. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.001

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  本研究以EGCG-O-甲基转移酶（EOMT）催化EGCG生成EGCG3"Me的产量为主要指标,探讨了重组大肠杆菌内EGCG-O-甲基转移酶的诱导表达条件。结果表明,当诱导剂IPTG终浓度为0.05mmol/L,诱导时间为20h,培养基初始pH为7.0,以及诱导温度为20℃时,EOMT的表达效果最佳。
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  酶处理对暑季安溪铁观音香气品质的影响

  肖世青, 张雪波, 杜先锋, 林锻炼

  茶叶科学. 2011, 31(4): 341-348. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.006

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  为改善暑季安溪铁观音的品质,对暑茶在加工过程中进行了添加漆酶、α-半乳糖苷酶和复合酶的处理。对加工得到的茶样进行感官审评比较并采用气相色谱–质谱法（GC-MS）检测茶叶的挥发性组分。结果表明,经过酶处理的茶样的香精油总量均大于对照样。α-半乳糖苷酶能显著增加醛类和醇类含量,漆酶能显著增加酯类含量,两种酶都能显著增加烯烃类含量。橙花叔醇、法呢烯和吲哚是铁观音中最重要的赋香成分,这3种组分在酶处理样中的含量均有所增加。感官审评结果表明,经复合酶处理后,暑茶青气消失,花香显现。感官审评和GC-MS检测均表明酶处理可以明显改善暑茶的香气品质。
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  茶叶中稀土氧化物总量现状及其溶出特性研究

  石元值, 韩文炎, 马立锋, 方丽

  茶叶科学. 2011, 31(4): 349-354. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.011

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  为明确当前我国茶叶中稀土氧化物总量（∑REOs）的现状及其溶出特性,分析了2007~2010年全国各地1245只茶叶中∑REOs的现状,并对不同含量及不同加工方式的茶叶进行溶出特性研究,结果表明：我国的茶叶中∑REOs中值约为2mg/kg,含量范围介于未检出至13.80mg/kg之间;90%以上的茶叶∑REOs小于5mg/kg,∑REOs残留量小于2mg/kg的茶叶比例为45%~65%;乌龙茶∑REOs残留量小于2mg/kg的茶叶比例低于50%,其他茶类如绿茶、花茶等,其∑REOs残留量小于2mg/kg的茶叶比例均在70%以上。当茶叶磨碎后其稀土浸出率均显著高于原样。茶叶加工过程中对芽叶的挤压程度可能是影响稀土浸出率的一个主要因素,各类茶的稀土浸出率为：针形茶<扁形茶<卷曲形茶<粉茶。茶汤中∑REOs以第1次冲泡最高,随着冲泡次数增加而递减。3次冲泡的总浸出率以乌龙茶粉最高,约为60%;其次是乌龙整茶,约为50%;针形绿茶的稀土浸出率最低,仅为5%。即使对总浸出率最高的乌龙茶粉而言,当乌龙茶粉干物质中的∑REOs达到6mg/kg,茶汤中的∑REOs也仍低于饮用水的限量指标。
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  绿茶茶汤中主要品质成分近红外定量分析模型的建立

  王玉霞, 徐荣荣, 任广鑫, 王胜鹏, 宛晓春, 张正竹

  茶叶科学. 2011, 31(4): 355-361. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.002

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  以绿茶茶汤为分析对象,在分析大量绿茶茶汤中主要品质成分含量的基础上,利用近红外光谱技术将化学分析结果与扫描茶汤样品得到的近红外光谱对应起来,采用偏最小二乘法（PLS）进行优化分析,建立了绿茶茶汤中水浸出物、茶多酚、游离氨基酸、可溶性糖、咖啡碱、儿茶素总量、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、没食子酸（GA）共11个指标或组分的定量分析模型,并对这11个模型分别进行了外部检验。结果表明,除ECG和GA外,其余指标或组分分析模型的交叉检验和预测模型的决定系数都在95%以上;除GA预测集RPD为2.67外,其余模型的RPD都在3以上,模型的稳定性和预测准确性较高。研究结果为利用近红外光谱技术分析茶汤或茶饮料中主要品质成分提供了新方法。
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  浙江省典型茶园生态系统中重金属流及其平衡分析

  麻万诸, 章明奎

  茶叶科学. 2011, 31(4): 362-370. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.012

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  选择浙西北、浙中、浙东和浙南等4个代表性产茶县市（长兴县、兰溪市、绍兴县和龙泉市）,进行了为期一年的茶叶生产过程中有机肥、化肥、大气沉降、茶叶收获物和地表径流中重金属流的定点定量分析,探讨了茶叶生态系统中重金属的年平衡值及其影响因素。结果表明,茶园生态系统中重金属来源物和农产品及排水中重金属流有较大的空间变异性。在施用化肥为主的茶园中,Zn、Cu和Pb输入主要为大气沉降,其次为有机肥施用;As的输入主要为大气沉降,其次为化肥施用;化肥施用对Cd和Hg的输入有较大的影响。在施用有机肥为主的茶园中,Zn、Cu、Cd和Hg的输入主要为有机肥的施用,其次为大气沉降;Pb和As的输入主要为大气沉降,其次为有机肥施用。以地表径流流失的Zn和Cu量高于因茶叶收获带走的Zn和Cu,而Pb、Cd、Hg和As的输出主要是通过茶叶的收获。在施用化肥为主的茶园中,Zn、Cu、Pb、Cd、Hg和As的年平衡值平均分别为313.0、11.8、41.2、2.95、0.22、2.18g/hm²;在施用有机肥为主的茶园中,Zn、Cu、Pb、Cd、Hg和As的年平衡值平均分别为849.3、303.4、66.3、2.59、0.47、7.43g/hm²。茶园系统中重金属的年平衡值有机肥施用为主的茶园高于化肥施用为主的茶园。
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  普洱茶渥堆发酵中嗜热真菌的分离和鉴定

  杨瑞娟, 吕杰, 严亮, 杨柳霞, 李晨晨, 姜姝, 盛军

  茶叶科学. 2011, 31(4): 371-378. https://doi.org/10.13305/j.cnki.jts.2011.04.007

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  应用传统的普洱熟茶渥堆方法进行发酵,研究分析普洱茶渥堆发酵过程中嗜热微生物的种类,应用测序技术对分离的微生物进行了鉴定。每天取样,进行微生物的分离、纯化及鉴定,并对分离出来的几种嗜热霉菌在不同温度、不同pH条件下培养,观察其生长情况。对普洱茶发酵过程中的微生物进行全面分析,运用分子生物学方法对分离的微生物进行鉴定。发现了普洱茶渥堆发酵过程中起重要作用的嗜热微生物,为揭示普洱茶高温发酵的机理奠定了基础。