茶树泛素活化酶基因全长cDNA克隆及序列分析

doi:10.13305/j.cnki.jts.2012.06.011

茶叶科学 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (6): 500-508.doi: 10.13305/j.cnki.jts.2012.06.011

茶树泛素活化酶基因全长cDNA克隆及序列分析

邓婷婷, 吴扬, 李娟, 李银花, 黄建安^*, 刘仲华^*

国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南农业大学茶学教育部重点实验室,湖南长沙 410128

收稿日期:2012-07-25 修回日期:2012-09-03 出版日期:2012-12-15 发布日期:2019-09-05
通讯作者: jian7513@gmail.com, Larkin-liu@163.com
作者简介:邓婷婷（1984— ）,女,博士研究生,主要从事茶树分子生物学的研究。
基金资助:
国家科技支撑计划（2011BAD01B01）、国家自然科学基金（30871572）、湖南农业大学人才稳定基金（07WD22）

Cloning and Sequencing of UBA1 Gene Full-length cDNA from Tea Plant

DENG Ting-ting, WU Yang, LI Juan, LI Yin-hua, HUANG Jian-an^*, LIU Zhong-hua^*

National Research Center of Engineering Technology for Utilization of Botanical Functional Ingredients, Key Lab of Tea Science of Ministry of Education of Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China

Received:2012-07-25 Revised:2012-09-03 Online:2012-12-15 Published:2019-09-05

摘要/Abstract

摘要： 应用cDNA-AFLP技术分离安吉白茶阶段性返白过程中的差异表达基因,获得一白期表达上调片断TDF（transcript derived fragment, TDF）。BLAST比对结果显示,该片段与其他物种的泛素活化酶基因有很高的相似性。通过SMART-RACE技术分别扩增出其3′和5′末端序列,成功获得该基因全长cDNA序列（GenBank登录号JN180299）。所得序列全长3764bp,其开放阅读框编码1094个氨基酸,蛋白分子量约为121kD。该基因的氨基酸序列与烟草、蓖麻、水稻、小麦、拟南芥中的UBA1基因编码的氨基酸序列分别有82%、81%、79%、79%、77%的同源性。qRT-PCR分析表明,安吉白茶UBA1基因在白化期的表达量是返绿期的2.49倍。泛素活化酶是泛素蛋白酶体介导的蛋白质降解系统中1个关键酶,茶树泛素活化酶基因的克隆为进一步研究安吉白茶阶段性白化的分子机理奠定了基础。

关键词: 茶树, 泛素活化酶基因, cDNA克隆, 序列分析

Abstract: The cDNA-AFLP technology was applied to analyze gene expression during periodic albinism process of Anji Baicha. Some transcript-derived fragments (TDFs) were isolated occurring in both the albinistic and re-greening stage leaves. One of them showed a high similarity to ubiquitin-activating enzyme 1 (UBA1) gene. Based on the fragment, the full length of UBA1 gene with 3764bp (GenBank Accession No. JN180299) cDNA was obtained via rapid amplification of cDNA ends (RACE), named Camellia Sinensis UBA1 gene. It contained an open reading frame (ORF) encoding a polypeptide of 1094 amino acid residues with a predicable molecular mass of 121kD. Analysis of the nucleotide sequence and deduced amino acid sequence showed 82%, 81%, 79%, 79%, 77% homology with UBA1 genes from Nicotiana tabacum, Ricinus communis, Oryza sativa subsp. japonica, Triticum aestivum, Arabidopsis thaliana, respectively. Analysis by qRT-PCR showed that the transcript of UBA1 was significantly up-regulated at the albinistic stage to 2.49-fold higher than that at the re-greening stage. This is a key enzyme in the ubiquitin-proteasome mediated protein degradation system. The clone and analysis of the tea plant UBA1 gene establishes a good foundation for further study on the molecular mechanism of periodic albinism in Anji Baicha.

Key words: Camellia sinensis (L.) O. Kuntze, Ubiquitin-Activating Enzyme 1(UBA1), cDNA cloning, sequence analysis

中图分类号:

S571.1
Q52

邓婷婷, 吴扬, 李娟, 李银花, 黄建安, 刘仲华. 茶树泛素活化酶基因全长cDNA克隆及序列分析[J]. 茶叶科学, 2012, 32(6): 500-508. doi: 10.13305/j.cnki.jts.2012.06.011.

DENG Ting-ting, WU Yang, LI Juan, LI Yin-hua, HUANG Jian-an, LIU Zhong-hua. Cloning and Sequencing of UBA1 Gene Full-length cDNA from Tea Plant[J]. Journal of Tea Science, 2012, 32(6): 500-508. doi: 10.13305/j.cnki.jts.2012.06.011.

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茶树泛素活化酶基因全长cDNA克隆及序列分析

Cloning and Sequencing of UBA1 Gene Full-length cDNA from Tea Plant

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