茶树花青素还原酶的酶学特性研究

doi:10.13305/j.cnki.jts.2013.03.008

茶叶科学 ›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (3): 221-228.doi: 10.13305/j.cnki.jts.2013.03.008

茶树花青素还原酶的酶学特性研究

杨琴¹, 赵磊², 刘亚军¹, 刘莉², 王云生¹, 高丽萍^1,*, 夏涛^2,*

1. 安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥 230036;
2. 安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,安徽合肥 230036

收稿日期:2012-12-28 修回日期:2013-02-18 出版日期:2013-06-30 发布日期:2019-09-04
通讯作者: *。
作者简介:杨琴（1987— ）,女,江苏南京人,硕士,主要从事茶树次生代谢及生物化学研究。
基金资助:
国家自然科学基金（30972401、31170647、1170282、31000314）、安徽省自然科学基金（11040606M73）、安徽省高校自然科学基金（KJ2012A110）

Research on Enzymatic Characteristics of Anthocyanin Reductase of Tea Plant [Camellia sinensis (L.) O. Kuntze]

YANG Qin¹, ZHAO Lei², LIU Ya-jun¹, LIU Li², WANG Yun-sheng¹, GAO Li-ping^1,*, XIA Tao^2,*

1. School of Biology Science, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China;
2. Key Lab of Tea Biochemistry and Biotechnology, Ministry of Education, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China

Received:2012-12-28 Revised:2013-02-18 Online:2013-06-30 Published:2019-09-04

摘要/Abstract

摘要： 茶树花青素还原酶（CsANR）作为原花青素生物合成途径中的关键酶,催化花青素为相应的2,3-顺式-黄烷-3-醇。为了研究该酶的酶学特性,本文采用原核表达及钴离子亲和柱纯化技术,表达并纯化出目的蛋白;重点对CsANR1酶学特性进行研究分析。结果表明,CsANR1的最适反应温度为40℃,最适pH值为6.5;对底物矢车菊色素的亲和力高于飞燕草色素。Cu²⁺、Co²⁺、Fe²⁺、Mn²⁺、Zn²⁺和Hg²⁺等金属离子对酶有抑制作用,存放15βd后酶活下降50%。

关键词: 茶树, 花青素还原酶, 原核表达, 酶学特性

Abstract: Anthocyanidin reductase (ANR) is a key enzyme in the biosynthetic pathway of proanthocyanidins(PAs), which catalyzes anthocyanidins into the corresponding 2, 3-cis-flavan-3-ols. For researching enzymatic characteristics of the enzyme, this study was carried out to express and purify the protein by prokaryotic expression and Cobalt ion affinity column purification. The optimal conditions of CsANR1 were observed at 40℃ and pH 6.5. The more substrate preference of CsANR1 was showed on cyanidin over delphinidin. Moreover, Cu²⁺, Co²⁺, Fe²⁺, Mn²⁺, Zn²⁺ and Hg²⁺inhibited the enzyme activity and the enzyme activity decreased 50% after storing 15 days.

Key words: tea plant[Camellia sinensis (L.) O. Kuntze], anthocyanin reductase, prokaryotic expression, enzymatic characteristics

中图分类号:

杨琴, 赵磊, 刘亚军, 刘莉, 王云生, 高丽萍, 夏涛. 茶树花青素还原酶的酶学特性研究[J]. 茶叶科学, 2013, 33(3): 221-228. doi: 10.13305/j.cnki.jts.2013.03.008.

YANG Qin, ZHAO Lei, LIU Ya-jun, LIU Li, WANG Yun-sheng, GAO Li-ping, XIA Tao. Research on Enzymatic Characteristics of Anthocyanin Reductase of Tea Plant [Camellia sinensis (L.) O. Kuntze][J]. Journal of Tea Science, 2013, 33(3): 221-228. doi: 10.13305/j.cnki.jts.2013.03.008.

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茶树花青素还原酶的酶学特性研究

Research on Enzymatic Characteristics of Anthocyanin Reductase of Tea Plant [Camellia sinensis (L.) O. Kuntze]

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